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人原鈣黏素ELISA試劑盒洗板及實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)
由于“人原鈣黏素ELISA試劑盒"具有的特異性,抗原抗體的結(jié)合發(fā)生在抗原的決定簇與抗體的結(jié)合位點(diǎn)之間。那么人原鈣黏素ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點(diǎn)。
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
人原鈣黏素ELISA試劑盒的樣品采集方法,是收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
實(shí)驗(yàn)科研者們往往對結(jié)果最為關(guān)注,而因此忽略了細(xì)節(jié)問題,但結(jié)果取決于細(xì)節(jié)!
根據(jù)采用的載體分為:
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.纖維膜為載體。
ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性,也不改變酶本身的活性。因?yàn)镋LISA試劑盒價(jià)格低廉且準(zhǔn)確性搞、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),所以適合大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。
ELISA需要遵循的幾個(gè)細(xì)節(jié)要點(diǎn):
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
除了以上內(nèi)容,在ELISA試劑盒細(xì)節(jié)中,稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。
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